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一、常见的细胞培养基黑人 巨屌 细胞培养基既是培养细胞中供给细胞养分和促使细胞生殖增殖的基础物资,亦然培养细胞滋长和养殖的活命环境。 黑人 巨屌 基础培养基(MM) 基础细胞培养基主要要素是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些扶持物资。合成培养基使用时还需添加一定量的血清使细胞保捏细致的滋长景况。 培养基的种类有许多,其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12是应用较为世俗的。其他如M199、IMDM、L15培养基等也用于某些细胞的培养。具体的特征及应用如下:
朝上滑动有瞻念看 培养基 特征 应用 BME细胞培养基 熟女论坛1955年Eagle议论,以BSS为基础,添加8种维生素,13种氨基酸,要素浅薄、便于添加 适于多样细胞系和特殊有计划用,在此基础上矫正的细胞培养基品种有MEM、DMEM、IMDM等 MEM细胞培养基 由Harry Eagle在Eagle基本培养基(BEM)的基础上发展而来的。MEM培养基仅含有12种必需氨基酸、谷氨酰胺和8种维生素,要素浅薄,主要用于贴壁细胞的培养,1959年修改配方,删去赖氨酸、生物素,增多氨基酸浓度,配方修改后也可用于其他类型细胞培养 顺应多种细胞单层滋长,是一种最基本、适用规模最广的培养基。因其养分要素所限,针对坐蓐之特定细胞培养与抒发时,并不一定是使用遵守最好大概最经济的培养基。此外,MEM细胞培养基有含Earle's均衡盐的类型,也有含Hanks'均衡盐的类型;有高压灭菌型的,也有过滤除菌型的;还有含非必需氨基酸的类型。应说明骨子情况凝视选定合适的 MEM 细胞培养基 M199细胞培养基 1950 年由 Morgan 等议论,除 BSS 外,含有53 种要素 添加适量的血清后,可世俗用于多种细胞培养,可用于病毒学、疫苗坐蓐以及大鼠胰腺上皮细胞和小鼠晶状体组织的培养 DMEM细胞培养基 由Dulbecco矫正的 Eagle 培养基,DMEM的氨基酸浓度是MEM的两倍,维生素浓度是MEM的4倍,同期还增多了非必须氨基酸、微量铁离子以及丙酮酸钠。分低糖型(1000mg/L)、高糖型(4500mg/L) 常用于杂交瘤的骨髓瘤细胞和 DNA 转染的涟漪细胞培养。举例 CHO 细胞抒发坐蓐乙肝疫苗、CHO 细胞抒发EPO IMDM细胞培养基 由Iscove's矫正的Eagle培养基,IMDM培养基在DMEM培养基的基础上添加了硒、HEPES、丙酮酸钠以及颠倒的氨基酸和维生素,养分相配丰富 可用于杂交瘤细胞和高密度细胞的快速培养 RPMI-1640细胞培养基 Moore等东谈主于1967年在Roswell Park Memorial Institute研制黑人 巨屌,针对淋巴细胞培养议论,BSS+21种氨基酸+维生素11种等要素 世俗应用于多样平素细胞和癌细胞的培养,尤其是悬浮细胞的培养 Ham's F10、F12细胞培养基 1963年、1969年由Ham议论,含微量元素,Ham's F-12以Ham's F-10养分羼杂物为基础议论而成的,可在血清含量低时用 F10适用于仓鼠、东谈主二倍体细胞,F12适用于CHO细胞。在低血清含量下时,绝顶顺应单细胞培养和克隆化培养,添加血清后也世俗应用于癌细胞和原代细胞的培养,如大鼠肝细胞、大鼠前哨腺上皮细胞、软骨细胞、大鼠成肌细胞、鸡胚胎细胞等 DMEM/F12细胞培养基 在DMEM培养基的基础上,添加F12培养基中更为丰富的养分要素,含有多种微量元素 世俗应用于多种哺乳类细胞的培养。同期,常算作汲引无血清培养基的基础,也适用于低血清含量下哺乳动物细胞的培养以及克隆密度培养 McCoy's 5A培养基 Thomas McCoy等东谈主在1959年议论的培养基,发轫特意用于Novikoff Hepatoma细胞的培养。McCoy's 5A培养基是矫正的Basal Medium 5A,与其他培养基不同的是,McCoy's 5A含有回话型谷胱甘肽、细菌卵白胨以及高浓度的葡萄糖 McCoy's 5A世俗用于多种类型的原代细胞的培养,如骨髓、皮肤、牙龈、肾、脾、肺、大鼠胚胎、网膜等。此外McCoy's 5A培养基还用于组织活检培养、细胞建系,以及一些淋巴细胞和较难培养的细胞的培养 L15细胞培养基 L-15培养基的缓冲系统由磷酸盐和游离碱基氨基酸构成,代替了传统的碳酸氢钠缓冲系统,同期,用半乳糖和丙酮酸钠代替葡萄糖不错谢却酸性代谢副产物的造成,有助于保管培养液PH的明白,顺应用于非CO2均衡环境的细胞培养 L-15培养基适用于猴肾细胞和HEP-2的培养、原代(如胚胎和成东谈主组织)细胞离别、多种病毒的培养以及神经元的培养等
全齐培养基(CM) 全齐培养基是在基础培养基中添加了血清、抗生素等物资,也叫(血清)细胞培养基。其中大部分细胞培养常用的是牛血清,因为牛血清中含有促进细胞增殖的多样滋长因子。此外为谢却羞辱,培养液中尚需加一定量的抗生素。 全齐培养基说明添加血清量的几许,可分为细胞滋长培养基和细胞保管培养基,用于不同细胞和不同有计划。
无血清细胞培养基(SFM) 无血清培养基是指在合成培养基的基础上引入要素全齐明确或部分明确的血清替代要素,主淌若由基础培养基和添加物(替代血清的补充因子)构成。其主要要素为下列几种:
黏附因子 约有80%的细胞是属于贴附型滋长。一般的细胞培养基是运用血清算作其起原,在无血清培养基中,细胞黏附因子便是很遑急的物资。
滋长因子 滋长因子是保管细胞活性与促进细胞增生、搬动、分化等,不成或缺的要素。
酶扼制剂 贴附型细胞一般多以胰卵白酶(trypsin)进行传代。在一般细胞培养中,血清中含有扼制trypsin的要素,是以无血清培养基必须添加trypsin扼制剂。 细胞转入无血清培养之前,要留有种子细胞,种子细胞按惯例培养于含血清的培养基中,以保证细胞的脾气不发生变化。 优点 1 未知组分少; 2 幸免血清对细胞的毒性作用和血清源性羞辱; 3 杂卵白含量少,幸免血清要素影响有计划抛弃或是家具制程,普及家具抒发水平并易于纯化。 瑕玷 1 无血清培养基资本较高; 2 不是通盘的细胞齐能在无血清培养基中培养; 3 细胞在无血清培养基中易受某些机械因素和化学因素的影响,培养基保存和应用方面局限性很大。
二、细胞培养基的选定 细胞培养基的种类许多,若何选定相宜的培养基是细胞培养的关节。在此提供以下提倡可供参考: 1、如果是新购买的细胞,不错向细胞株的厂家参谋,大概联系引种起原查找细胞库上对应的培养基; 2、说明细胞的特色及施行的需要来选定培养基; 3、我方考验,用多种培养基培养细胞,作念滋长弧线,纪录细胞的滋长速率,不雅察细胞的样式变化,说明施行抛弃选定最好培养基。 培养基种类和细胞系并不是一个强制的对应相关。具体培养细胞使用什么培养基,主要还是说明数据库、文件和劝诫哦!
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