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情色艺术中心 工夫著述:碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒(磷酸苯二钠比色法)

发布日期:2024-09-02 09:47    点击次数:190

情色艺术中心 工夫著述:碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒(磷酸苯二钠比色法)

  碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒(磷酸苯二钠比色法)情色艺术中心

  居品简介:

  碱性磷酸酶(Alkalinephosphatase,简称ALP或AKP)为一类磷酸酯酶,平日漫步于哺乳动物组织内,其活性最适pH9.2~9.8。

  碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒(磷酸苯二钠比色法)(AlkalinePhosphataseColorimetricAccayKit)接管磷酸苯二钠比色法,其检测旨趣是磷酸苯二钠在碱性要求下,可在碱性磷酸酶的作用下生成游离的酚和磷酸。通过分光光度比色法测定510情色艺术中心nm处吸光度,据此通过比色分析就不错算出碱性磷酸酶的活性。该试剂盒用于检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血液、血清等样品中内源性的碱性磷酸酶活性。该试剂盒仅用于科研规模,不宜用于临床会诊或其他用途。

构成:

居品称号

KE001-50T

KE001-100T

Storage

试剂(A):ALPAssaybuffer

25ml

50ml

4℃避光

试剂(B):ALP显色液

25ml

50ml

-20℃避光

试剂(C):显色基液

75ml

150ml

-20℃避光

试剂(D):Phenol圭臬(1mg/ml)

1ml

2ml

RT

试剂(E):ddH2O

5ml

10ml

RT

诠释书

一份

储存要求:

4℃,三个月灵验。

操作设施(仅供参考):

1、配制圭臬品使命液:按照下表稀释系列圭臬品溶液。

 

0

1

2

3

4

5

Phenol(0.05mg/ml)(ml)

0

0.1

0.2

0.3

0.4

0.5

ddH2O(ml)

0.55

0.45

0.35

0.25

0.15

0.05

额外于金氏单元(U/L)

0

10

20

30

40

50

 

     2、准备样品:①细胞或组织样品:取顺应细胞或组织裂解液,淌若有必要需进行符合匀浆,低速离心取上清,-80℃冻存,用于碱性磷酸酯酶的检测。②血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照惯例设施制备后不错径直用于本试剂盒的测定,尿液赓续也不错径直用于测定,-80℃冻存,但为了摈斥样品自己神气的骚动,需诞生加了血浆或血清但不加底物的对照。③高活性样品:淌若样品中含有较高活性的碱性磷酸酶,不错使用原有的裂解液或PBS等进行稀释,如鸡血清、血浆可稀释5~10倍后检测。

3、加样:按照下表诞生对护士、圭臬管、测定管,溶液应按照律例轨范加入,并镇定幸免产不满泡。淌若样品中的碱性磷酸酯酶活性过高,不错减少样品用量或符合稀释后再进行测定。样品的检测最佳能诞生平行管。

加入物ml

对照孔

圭臬孔

测定孔

Phenol圭臬(1-5号管)

 

0.55

 

待测样品

   

0.55

ALPAssaybuffer

0.50

0.50

0.50

37℃水浴中孵育5min

ALP显色液(37℃提前孵温)

0.50

0.50

0.50

立即混匀,37℃水浴中准确孵育5min

显色基液

哥要射

1.50

1.50

1.50

待测样品

0.55

   

       4、用分光光度计,以0号管(ddH2O)调零,读取对护士、圭臬管、测定管的510nm吸光(即A对照、A圭臬、A测定),如无法检测510nm,亦可检测500~530nm范围内吸光,一般应数小时内检测终了。

狡计后果:

以系列Phenol圭臬(1~5号管)对应的金氏单元为x轴,以相应的A(1~5号管)为y轴,A测定-A对照的差值为施行的吸光度,用该差值与圭臬弧线进行对比,求出酶活力单元。

参考区间(37℃):

1、健康成年东谈主:3~13金氏单元。

2、健康儿童:5~28金氏单元。

镇定事项:

1、 待测样品中不成含有磷酸酶阻拦剂,同期需幸免反复冻融。

2、淌若莫得分光光度计,也不错使用酶标仪测定。

3、所测样本的值高于圭臬弧线的上限,应稀释样品后再行测定。

4、空缺管淌若显红色,诠释ALP显色液不可用,应丢弃。

5、加入显色基液时,应赶快,何况实时混匀,不然显色不充分。

6、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

7、本居品仅供科研使用,严禁它用。

 

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